Transcription
السلام عليكم ورحمه الله وبركاته.
أهلاً وسهلاً بكم اعزائي الطلاب. معكم دكتور عبد الرحمن العتابي والسكشن جديد بعنوان الصبغ الصامد للأحماض أو أسيد فاست استيد.
الأحماض تتبع مجموعة من طرق الصبغ اللي هي الدفرنسا الاستين والتفريقي. وقلنا قبل كده تسمى بهذا الاسم لأنه دائماً بيقسم البكتيريا لمجموعتين موجبة وسالبة أو بيفرق ما بين البكتيريا وبعضها البعض.
الصبغ الصامت للأحماض والأسيد، احنا هنشرح النهارده بتكنيك زين نيلسون أو بطريقة ايه زين نيلسون. يعني في أكثر من طريقة احنا بنشتغل على تكنيك زد. في البداية خالص نتعرف يعني إيه أصلاً أسيد فاست بكتيريا أو يعني إيه بكتيريا صامدة. هي البكتيريا في الحقيقة ما هياش صامدة في طريقة النمو بتاعتها، يعني مش هتبقى مقاومة للأحماض في النمو. إنما هي طريقة الصبغ بتاعتها إن هي صعبة. هي صامدة للأحماض بسبب معين احنا هنعرفه دلوقتي.
البكتيريا ديت زي كثير من البكتيريا بتتبع المايكروباكتريا الليبرا وده اللي بيسبب مرض الجذام، والمايكروباكتريا تيوب كلوزس. وكذلك الجينس نوكارديا زي انه كارديا برازيلينسز. البكتيريا ديت سواء المايكروباكتريا بتتبع مجموعة من البكتيريا اللي احنا تكلمنا عنها قبل كده اللي هي الأكتينا الأكتينوبكتيريا. ودي بكتيريا في الغالب بتنمو في صورة خيوط أو عصويات طويلة. بتبقى عصويات طويلة وبيتكون برضه ايه بيتكون خيوط. وكذلك انه كارديا اللي هما قرايب أو أخوات الاستربت تميز اللي احنا كنا اشتغلنا فيه في صبغ جرام وكنا بناخذه من تحت سطح البيئة.
ايه المميز بقى في المايكروباكتريا؟ المايكروباكتريا بتاعها واكسي ماتيريال أو طبقة شمعية. طبقة شمعية بتتكون غالباً من المايكوليك أسيد. الطبقة الشمعية ديت عبارة عن جلايكو لبنت جلايكو ليبيد. يعني جزء منها عبارة عن كربوهيدرات وجزء منها وباقي التركيب عبارة عن ايه عن الليدات.
لو جينا نشوف الرسمة اهيت. في الرسمة هنا بيوضح الأغشية الخلوية بتاعة الخلية البكتيرية الأسيد فاست بكتيريا. احنا عايزين عارفين إن أول غشاء جوه الخلية اسمه اللي هو السيتوبلازمك ميمبران أو الغشاء السيتوبلازمي. وبعدين الجدار الخلوي اللي هو بيتكون من الببتيدوبلايكان. وبعدين في طبقة بقى شمعية برضه ده اللي بيميز هذا النوع من البكتيريا. الطبقة الشمعية ديت بتكون من جلايكو ليفت عبارة عن جزء عبارة عن كربوهيدرات اللي هو اربينو وجلكتان وده جزء كربوهيدراتي. وطبقة عبارة عن الليدات وفاتي أسيدس اللي هي المايكوليك أسيد. واحنا بنركز قوي على المايكوليك أسيد ده.
طب ايه اللي بتعمله الطبقة دي؟ انت دلوقتي مبدئياً كده البكتيريا بتبقى موجبة لجرام. مايكروباكتريا بكتيريا موجبة تمام ومتغطية بره الجدار الخلوي بطبقة شمعية. الطبقة الشمعية دي بتمنع دخول أي صبغات إلى داخل الخلية. هي طبقة ايه بتخلي الجدار بتاعه الخلية نيرلي امبير امبير هنا يعني غير منفذة. بيبقى الجدار الخلوي متشمع من بره كأنك مغلفه بمشمع من بره فغير منفذ. فبالتالي الصبغات العادية ما تقدرش تدخل جوه. الصبغة لو جيت تستخدم الصبغ بالطرق العادية مش هتقدر الصبغات تدخل جوه الخلية زيها زي اللي احنا اخذناها قبل كده في الدفران. زيها زي الجرثومة. الجرثومة برضه طبقات غليظة وطبقة شمعية بره فبتمنع دخول الصبغات. كذلك الأسيد بكتيريا عند الجدار الخلوي فوقه طبقة تانية أو طبقة شمعية بتحيط بالجدار كله. الأكثر حاجة مميزة أو الأكثر حاجة في الكمية في هذا الطبق الشمعي هي المايكوليك أسيد. ده حامض من الأحماض الدهنية بيمنع نفاذ الصبغات داخل الخلية. ده المميز في هذا النوع من البكتيريا.
طيب أنا قلت البكتيريا ديت موجبة لجرام. لو جيت أفحصها أو اشتغل عليها بتكنيك جرام غالباً مش هتدي نتيجة موجبة لجرام. ممكن تدي نتيجة سالبة لجرام أو اللون بتاعها يبقى فاتح قوي مقابل الجرام. المفروض بتبقى لونها غامق أو لونها بنفسجي. النتيجة بتاعتها بيبقى لونها لون الخلايا البنفسجي والسالبة لجرام بتطلع باللون الأحمر. ديت لو اتصبت بتكنيك جرام مش هتدي النتيجة المضبوطة. ليه بقى؟ لأن صبغة الجينسيان اللي أنا بحطها في الأول مش هتقدر تدخل جوه الخلية. مش هتقدر تدخل جوه الخلية لأن الجدار هنا غير منفذ تقريباً لأنه محاط بطبقة شمعية. فبالتالي هتجيء أنت تشوفها تحت الميكروسكوب هتشوفها بلون فاتح فهتفتكر إن هي سالبة لجرام ولكن هي في الحقيقة موجبة.
طيب أنا عايز أصبغ هذا النوع من البكتيريا. هو فرق منه بينه وبين البكتيريا الثانية. فرق ما بينهم. هنا بقى تكنيك زل نيلسون بيستخدم صبغة زي الكربو الفوكسين. والكربو الفوكسين هي في الحقيقة عبارة عن فوكسين زائد فينول. الفينول هنا بيتحط على الصبغة كموردنت أو مثبت للون. يعني بيقوي صبغة شوية وبيخليه لها قدرة على النفاذ أكثر. وأحط الفينول على الفوكسين فبقول ايه باقوي الصبغة بس كده. يعني لو استخدمت صبغة الكربو فوكسين اللي هي الكربو اللي هي الفوكسين معدلة بأحط عليها فينول هتدخل جوه البكتيريا؟ لا لازم أعمل أسخن البكتيريا. أسخن الشريحة على اللهب لمدة خمس دقائق زي ما عملت مع صبغة الجراثيم. الطريقة ديت أو الحركة دي إن أنا بسخن وبستخدم صبغة مع فينول أو موردنت اللي هو الفينول. ده بيساعد على زيادة البرميابيلتي على زيادة النفاذية في الجدار الخلوي بتاعها هذه البكتيريا المحاطة بالطبقة الشمعية دي. فبالتالي بقدر أدخل الصبغة جوه الخلية. يبقى أنا كده دخلت الصبغة جوه الخلية. بعد كده طبعاً أنا بغسل الزيادة من الصبغة وأسيب الشريحة تبرد. ديت لازم أساسي جداً إن أنا أسيب الشريحة تبرد علشان الـ الـ الـ النفاذية اللي أنا عملتها في الجدار ديت تتقفل مع البرودة. تبدأ الوضع الطبيعي يرجع وتحتفظ بالصبغة جواها.
طيب أنا صبغت الخلية بقى اللي هي الأسيد فاست بكتيريا. ايه المميز هنا؟ المميز هنا واللي جه منه التسمية بتاعة الأسيد فاست بكتيريا إن أنا لو جيت أعمل ديكالوريزيشن بالأسيد الكحول. باستخدم كحول وبحط عليه حامض. فقوة الكحول الـ الكحول الحامضي دوت بتبقى أكبر في إزالة الصبغة من الخلايا. هنا حتى باستخدام الأسيد الكحول ما بقدرش الصبغة ما بتطلعش بره الخلية. الأسيد فاست بكتيريا بتحتفظ بالصبغة اللي هي لونها أحمر بقى اللي هي الكربو الفوكسين. بتحتفظ بالصبغة داخل الخلية وبتظهر لي باللون الأحمر.
هستخدم بعد كده كاونتر ستين عشان أفرق ما بين الأسيد فاست بكتيريا. طبعاً بكتيريا مع استخدام إزالة للون بيخرج بره الخلية وتبقى الخلية شفافة. فبالتالي بس بصبغ بصبغة مضادة اللي هي الميثيلين بلو أو أزرق الميثيلين لمدة خمس دقائق ولكن بدون تسخين. فبتتلون. وبتظهر باللون الأزرق. يبقى ده أسيد فاست بكتيريا. يبقى أنا سميتها أسيد فاست أو صامدة للأحماض ليه؟ لأن الصبغة اللي دخلت بالتسخين. الصبغة اللي دخلت بالتسخين ما بقدرش أشيلها أو أعمل ريزيشن حتى باستخدام الأحماض. حتى باستخدام الأسيد الكحول. ولذلك اتسمت أسيد فاست بكتيريا. اللي هي البكتيريا الأحمر والتكنيك اسمه اسمه أسيد فاست ستين. اسمه صبغ الصامل.
تمام كده؟ ايه مراجعة سريعة كده بنقول بعض أنواع البكتيريا الجدار الخلوي بتاعها بيكسوها طبقة دهنية أو شمعية لا تسمح للصبغة بالدخول عند الصبغ بطرق بسيطة. ولذلك عشان أصبغها لازم أستخدم صبغة قوية بتحتوي على مثبت اللون الكالفينول. فبستخدم صبغة الكربو الفوكسين وبتركها عليها الفترة طويلة وبتسخن شوية. لو اتصبت هذه الأنواع من البكتيريا بتثبت فيها الصبغة ويصعب إزالتها مرة أخرى حتى باستخدام الكحول الحمضي.
احنا قلنا التكنيك اللي احنا هنستخدمه النهارده هو التكنيك ذيل نيلسون. التكنيك زين نيلسون بستخدم برايمر ستين للكربو الفوكسين. وأنا قلت الكربو الفوكسين عبارة عن فوكسين وعليها فينول. فينول كـ موردنت أو كمثبت ليه اللون. الكربو فوكسين بيتحط لمدة ثلاث لخمس دقائق مع التسخين البسيط. ونفس الملاحظة اللي احنا بناكد عليها إن احنا بنتجنب غليان أو جفاف الصبغة. بعد فترة التسخين لمدة خمس دقائق دي باسيب الشريحة لغاية ما تبرد. وبعدين أعمل ديكلاريزيشن. لازم أشتري بالشريحة لغاية ما تبرد دي حاجة أساسية علشان الأمور ترجع لطبيعتها والخلية المسام بتاعتها تقفل. لأن أنا عملت على زيادة المسامية بعملية التسخين. فبسبها تبرد شوية وبعدين بعمل بالأسيد الكحول أو الكحول الحامضي. وبعدين أغسل بالميه تاني. وبعدين أستخدم الكاونتر ستين أو الصبغة المضادة اللي هي الميثيلين بلو لمدة خمس دقائق. لأن مثلاً لمدة خمس دقائق. لأن احنا قلنا قبل كده إن الميثيلين بلو صبغة ضعيفة نسبياً فلازم أسيبها على الغشاء لفترة طويلة. ولكن بناكد إن الميثيلين بلو بدون تسخين.
هنشوفه المعمل هنلاقي الناس بتسخن الصبغة الأولى وبتسخن الصبغة الثانية. الصبغة الثانية ما بتتخنش. الصبغة الثانية بأضيفها ليه؟ لأن الهدف إن أنا أفرق ما بين الأسيد فاست بكتيريا وأنا أسيد فاست بكتيريا. الأسيد فاست بكتيريا هتاخد اللون الأزرق بسهولة ما فيش فيها مشاكل. بس هذه الصبغة لمدة خمس دقائق بدون تسخين. ده تكنيك اسمه تكنيك ظل.
لو جينا نشوف خطوات الصبغ بتاعتي في الصورة دي. لو أنا عندي أسيد فاست بكتيريا. بكتيريا بكتيريا غير صامدة. بستخدم البرايمر ستين اللي هي الكربو الفوكسين. فكل الخلايا سوست أو نان أسيد فاست بكتيريا بتتلون باللون الأحمر. بعمل ديكلاريزيشن. بكتيريا ولكن لا ينجح في إزالة الصبغة من الأسيد فاست بكتيريا. بينجح إن هو يشيلها من البكتيريا غير الصامدة للأحماض. لأن ما فيش الطبقة الشمعية اللي هتحتفظ بالصبغة. إنما هنا بيفشل. بيفشل الأسيد الكحول في إزالة الصبغة أو إزالة اللون من الأسيد فاست بكتيريا. بعد كده بتضيف الكاونتر ستين اللي هي الميثيلين بلو. فبتلون الـ نان أسيد فاست بكتيريا باللون الأزرق اللي هو اللون الكاونتر. وبتظل الأسيد فاست بكتيريا محتفظة باللون الأحمر. فبالتالي بتبان النتيجة في النهاية.
دي الخطوات هناخذها سكرين شوت. وبتبان النتيجة في النهاية بالشكل ده. الخلايا اللي لونها أحمر بتبقى أسيد فاست بكتيريا. والخلايا اللي لونها أزرق. بتاعنا اللي احنا بنقوله إن هو بكتيريا أسيد فاست. اللي هو المايكروباكتريا تيوبيركلوزس. ودي بتبقى بكتيريا عصوية. والعصوية دي أحياناً بتبقى طويلة. شبه خيوط الفطر أو قريبة من خيوط الفطر زيها زي الاستربتومايسس تقريباً. بتبقى الخيوط قصيرة شوية. ولكن ولذلك هي اسمها مايكروباكتريا. أنا قلت كلمة مايكو دي قبل كده لأنها شبه الفطريات. مايكو جاية من مايكو. مايكولوجيا. احنا علم الفطريات اسمه مايكولوجي. والكينج داوم فانجاي أو الكينج داوم مايكوتا. فالاسم جاي من مايكو دي. هي بكتيريا شبه الفطريات. لأنها بتسبب مرض التيوبيركلوزس أو مرض السل. وديت أسيد فاست بكتيريا بتظهر تحت الميكروسكوب بالتكنيك ده باللون الأحمر.
عندي المثال الثاني اللي هو المايكوبكتيريا ليبرا. وديت بكتيريا كروية موجبة لجرام. ولكن هي من أسيد فاست بكتيريا. فبتظهر بلون الكاونتر اللي هي الأزرق. الميثيلين بلو. أنت بتظهر باللون الأزرق. وأهمية طبية لأنه بيساعد في تشخيص مرض التيوبيركلوزس أو مرض السل. ويبقى عن طريق اختبار اسمه التي بي تي اس. التي بي جاية من توبركلوزس. اختبار التي بي. واختبار التي بي هو نفس التكنيك اللي احنا بنشتغل به. كل اللي بيعمله إن هم بياخدوا مسحة من المريض. غالباً في المايكروباكتريا بتقبل الأخذ منه اللعاب المريض. بياخدوا مسحة كده من اللعاب في الفم وبيحطوها على الشريحة وبيجففوها على اللهب أو يسيبها تجف في الهواء. وبيثبت الشريحة بامرارها في اللهب مرتين ثلاثة. وبعدين يطبق عليها نفس التكنيك الكربو فوكسين لمدة خمس دقائق مع التسخين البسيط. بعدين يعمل ديكلاريزيشن بالأسيد الكحول. وبعدين يصبغ بالكونتر ستين بلو. فلو شاف طبعاً الفم بيبقى فيه ميكروبات عديدة ما هياش هتبقى الطيبة. فلو شاف عصويات طويلة لونها أحمر بالشكل ده يبقى المريض ده عنده مايكروباكتريا تيوبيركلوزس. وكذلك عندي برضه المايكروباكتريا ليبرا دي بتسبب مرض الجذام وهي برضه أسيد فاست بكتيريا.
ده بالنسبة للجزء النظري من السكشن. هنسمع بقى مع بعض كده الجزء العملي.
السلام عليكم ورحمه الله. النهارده إن شاء الله مع بعض هنتعلم كده ازاي نعمل شريحة بطريقة جديدة وهي الأسيد فاست بكتيريا أو صبغ البكتيريا الصامدة للأحماق أو الصبغ الصامت للأحماض. المزرعة اللي هنشتغل فيها النهارده هي مزرعة مايكروباكتريا. بيبقى النمو أصفر على سطح البيئة. وده اللي احنا هناخذ منه النمو. زي ما بنقول كل مرة.
أول حاجة بجهز الشريحة. بنظفها بورق نشاف أو منديل الورق. ده شكله أفضل طبعاً. بأمررها كلها في اللهب مرتين ثلاثة من الناحيتين للتحقيق. ودي تنظيف الشريحة. بعد كده باخذ نقطة ميه صغيرة. بنقول نقطة ميه صغيرة فهي نقطة صغيرة. لأن في ناس بتحط نقطة ميه كبيرة على الشريحة. لا هي نقطة ميه صغيرة على الشريحة بالشكل ده. وديت ممكن كمان كبيرة شوية.
بعد كده معي إبرة التلقيح. بمسكها بثلاث صوابع وسبعين حوريين. الحركة. بعقم إبرة التلقيح في اللهب. أملاها في اللهب لدرجة الاحمرار بالشكل ده. معايا المزرعة في نفس الطريقة. بأمسك المزرعة بثلاث صوابع من أسفل بحيث إن سطح النمو كله واضح قدامي. أنا مطلوب مني إن أنا آخذ جزء صغير من النمو الأصفر. فبدخل بالابرة أمسح بس المزرعة كده مسحة صغيرة. آخذ جزء من النمو الأصفر بس. مجرد كده ما بأكسرش في الميديا ولا حاجة. الجزء اللي أنا أخذته ده بأمسكه كويس على الشريحة. بأمسكه كويس على الشريحة. بأحس إن الميه اللي أنا حاططها نقطة الميه دي بتعكرت. مجرد التعكير دي يبقى ده شغلك. فردتها على الشريحة وبعمل بعمل الشريحة في المنطقة اللي في وسط الشريحة. بأعمل الجزء ده فاضي والجزء ده فاضي. وبعمل الغشاء في منتصف الشريحة. بعد كده بعقم الإبرة. يبقى الإبرة بتتعقم قبل وبعد كل استخدام. وأرجعها في مكانها.
بمسك الشريحة والمشبك. وبعدين أجففها أعلى اللهب. التكفيف أعلى اللهب بيبقى فيه مسافة بينك وبين اللهب. لو أنت قربت قوي أنت كده بتحرق الغشاء وبتحرق الخلايا مش هتقبل الصبغ. فلازم يتم. المفروض أصلاً التجفيف يتم هوائي. بس احنا علشان نسهل الأمور ونقول تكفيف أعلى لهب. على نار هادية. ما نقربش الشريحة بحيث إن هي تسخن قوي. حسيت إن الشريحة بتسخن بترفع إيدك لفوق. بحيث إن الشريحة عملت السخونة قوي. تمام. بعد ما بتجفف الشريحة أعلى اللهب كده جفت معي اهي. بأمررها كلها في اللهب مرتين ثلاثة. وبمسك الشريحة. معنى إن أنا قادر أمسكها بإيدي إن هي ما سخنتش قوي.
بعد كده دي الخطوة الأولى من أي تكنيكات من تكنيكات الصبغ اللي هي إيه؟ عمل أو بريبريشن أو بكتيريا سمين. اللي هو عمل غشاء البكتيريا وتثبيته. بثبته بامرار في اللهب مرتين ثلاثة. لازم أكون ماسك الشريحة بإيدي وماتأكد إن الشريحة بتاعتي مش سخنة. علشان أحط البرايمر ستين أو الصبغة الأساسية بتاعتي. الدراما ستين هنا عبارة عن الكربو الفوكسين. هي عبارة عن فوكسين محطوط عليها موردنت اللي هو الفينول. الموردنت اللي هو مثبت للون أو بيدي قوة للصبغة زيادة. وعندي ديكلاريزيشن اللون بالكحول. وعندي الكاونتر ستين أو الصبغة المضادة عبارة عن الميثيلين بلو. أزرق الميثيلين. يبقى قوي في إزالة اللون عن الكحول العادي. من الصبغة الكربو الفوكسين. في منتصف الشريحة هحط أكثر من نقطة. أربع خمس نقط على الأقل. وبعدين بعمل تسخين للصبغة زي المرة اللي فاتت ما عملنا فيه شيفاروفيلتون. تكنيك تسخين للصبغة أعلى لهب بحيث إن الصبغة ما تغليش وما تنشفش على الشريحة. ما تنشفش يعني إيه؟ ما تنشفش يعني مجرد ما الحواف بتبدأ تنشف كده. أول ما تبدأ الصفحة خلاص بتنشف. لا أنا بأزود صبغة. طيب لو بدأت تغلي مني؟ لا أبعد. يبقى شغلك كده مش مضبوط.
فاحنا بنحطها على الشريحة لمدة خمس دقائق مع مراعاة عدم جفاف أو غليان الصبغة. خلاص بالوضع ده لمدة قد إيه؟ خمس دقائق. بعد ما بيخلص الخمس دقائق بتخلص من كل الصبغة الموجودة على الشريحة بالشكل ده.
[موسيقى]
تمام. بعد كده بعمل ديكلاريزيشن أو إزالة اللون باستخدام الكحول. بنزل قطرات من الكحول قطرة قطرة على الغشاء لغاية ما اللون اللي نازل يبقى شفاف خالص. أو اللون الأحمر يبقى شفاف بالشكل ده. نلاحظ هنا إن أنا مجففتش الصبغة الأولى. احنا بنشتغل على الصبغة الأولى وبأغسل الزيادة من الصبغة ولكن ما بأقفش. بأعمل ديكلاريزيشن على طول بالأسيد الكحول أو الأسيد. بيبقى شفاف خلاص. يبقى أنا كده عملت الديكلاريزيشن اللون. بعد كده بأغسل برضه الكحول بالميه. بعد كده بأضيف الكاونتر ستين أو بأصبغ بالكاونتر ستين الصبغة المضادة اللي هي الميثيلين بلو أو أزرق الميثيلين. اهي هنا أزرق الميثيلين صبغة ضعيفة شوية. فبأسيبها خمس دقائق على الشريحة بدون تسخين. هسيبها على الحامل اللي موجود بقى على الاستاند ده لمدة خمس دقائق. نحسب خمس دقائق. وكل ما زودت المدة يكون أفضل. ممكن نخليها سبع دقائق. لأن الميثيلين بلو صبغة ضعيفة فمحتاجة مدة صبغ طويلة. بعد ما بيخلص الخمس دقائق بتخلص من الزيادة من الصبغة في حوض الصدر بالشكل ده. كده تقريبا خلصت الشريحة. في الآخر خالص بقفل الغشاء. وبرضه ما نقربش زيادة عشان ما نحرقش الغشاء الموجود على الشريحة.
هنا المفروض إن أنا بعد ما أفحص يا إما البكتيريا يطلع لونها أحمر باللون البرايمر ستين أو أزرق بلون الكاونتر ستين على حسب نوع البكتيريا. لو هي أسيد فاست بكتيريا بتطلع باللون الأحمر فتحتفظ بالصبغة الأساسية. لو هي نان أسيد فاست بكتيريا يعني بكتيريا غير صامدة للأحماض بتذهب باللون الأزرق. بسجل الكلام ده. شكل الميكروب واللون بتاعه. وأعرف النتيجة بعد الفحص بالمايكروسكوب. وأمرر الشريحة كلها في اللهب للتثبيت. أتأكد إن الشريحة جاهزة للفحص. يبقى أنا ما أحط الصبغة على الشريحة وهي سخنة. ما بأمررها من اللهب قوي. وفي الآخر برضه بأحطش الزيت على على الشريحة وهي وهي سخنة.
أسيد فاست بكتيريا. شكراً جزيلاً.
حاجة أخيرة هزودها. احنا دلوقتي المفروض إن احنا في خامس سكشن للصبغة. في المفروض الموضوع ضبط الميكروسكوب ده يكون اتضبط معنا كل الناس يعني. فأنا بأعيد تاني الملاحظة بتاعة ضبط الميكروسكوب أو ازاي أنا هاضبط الميكروسكوب. أول حاجة طبعاً أنا بأحط الشريحة على الميكروسكوب. بأحط نقطة الزيت بتاعتي. ثاني حاجة بأغمس العدسة في الزيت. عند العدسة الزيت هنا باستخدم لينس. فبأغمس العدسة في الزيت. بأغمس العدسة. بأغمس العدسة في الزيت ازاي؟ بأحرك الضوابط الكبيرة الاثنين. بأمسك بإيدي الاثنين الضوابط من الناحية دي ومن الناحية دي اللي هو الضابط الكبير. وحركة للخلف. هنرجعه لورا كده بالراحة لغاية ما أشوف وعيني على العدسة. عيني هنا على فين؟ على العدسة الشيئية اللي هي اللي تحت العدسة الزيتية عشان أشوفها وهي بتنزل في الزيت. لازم ولا بد إن أنا بعيني أشوفها وهي بتنزل في الزيت. طيب بعد ما العدسة في الزيت خلاص. ببص أنا بقى في الأوكلارينزا والعدسة العينية. بأمسك الضوابط الصغيرة من الناحيتين برضه بتاع الميكروسكوب. ما بأمسكش من ناحية واحدة لا. حرك من الناحيتين. أمسك الصغير اللي هو ده. من الناحيتين بإيدك الاثنين. وأبدأ أحركهم لـ إيه؟ عكس الحركة الأولى بقى لقدام. لو حركت لورا هتكسر الشريحة. لأن أنت كده هترفع المسرح. هترفع المسرح فهتنزل العدسة على الشريحة بزيادة فهتكسر الشريحة وممكن العدسة تتكسر مننا. لا نحرك الضوابط الصغيرة للأمام. حركة مستمرة ولكن ببطء لغاية ما تظهر معي الشريحة. تمام كده؟ يبقى أنا بأرفع المسرح بالضبط الكبير. بحرك بحركة الخلف وعيني على العدسة الزيتية لغاية ما تنغمس في الزيت. بعد كده. أبص في الأوبرالز وأحرك الضوابط الصغيرة للأمام. بحركة بطيئة ولكن مستمرة. لغاية ما تظهر الشريحة معايا. شكراً جزيلاً. وأرجو من الناس تكون تكون بالنسبة لها واضح. شكراً لكم جميعاً.