Transcription
[موسيقى] آمل أن تكونوا بخير، وأنكم لستم متعبين. هل أنتم [موسيقى] شبعتم؟ حسناً، أنتم لستم متعبين. في هذه المحاضرة أو في هذه الحلقة، سنقوم بإجراء اختبار تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). اختبار تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية، من فضلكم، من فضلكم، إلى أين أنتم ذاهبون؟ تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية. لماذا نقوم بتحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية في عملية زرع؟ إنها مهمة لعملية الزرع. لماذا تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية مهم؟ يجب أن يتم قبل عملية الزرع لأن الجسم سيرفضها. هذا بسبب أن الجهاز المناعي للمتلقي سيرفض عملية الزرع. نقوم بتحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية لمنع رفض عملية الزرع. هل أنا على حق؟ نعم، نعم. حسناً، لماذا نقوم بتحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية لمنع رفض عملية الزرع؟ لمعرفة العلاقة، لمعرفة ما إذا كان الجهاز المناعي يقبل المادة الجديدة و [غير واضح] الجديدة. الجهاز المناعي يقبل الخلايا الجديدة، الأنسجة الجديدة مثل الكلى، العضو. لا، نعم، هذا صحيح. ولكن من بين العديد والعديد من المستضدات على خلايا الجسم، على سبيل المثال، على الكلى، لدينا العديد والعديد من المستضدات. حسناً، لدينا العديد من المستضدات على خلايا الكلى التي سيتم زرعها. لماذا نتحقق فقط من بعض المستضدات مثل مستضدات الكريات البيضاء البشرية؟ لماذا لا نتحقق من جميع المستضدات؟ أنتم تتحققون فقط من بعضها. ما الفرق بين المستضدات التي يجب أن نتحقق منها والمستضدات التي لا نتحقق منها؟ لا نتحقق من تشابهها. إنها ليست مهمة في رفض أو قبول عملية الزرع. ما الفرق بين نوعي المستضدات؟ دعوني أطرح سؤالي مرة أخرى. على الكلى التي سيتم زرعها، هناك العديد من المستضدات. هل هذا واضح؟ ولكن من بين عدد هائل من المستضدات، نتحقق فقط من بعضها، بما في ذلك مستضدات الكريات البيضاء البشرية. لماذا نتحقق فقط من بعض المستضدات على الطعم لمنع رفض عملية الزرع؟ لأن المستضدات الأخرى متشابهة. نعم، معظم المستضدات متشابهة بين الأشخاص في السكان، بين الأشخاص المختلفين. ما هي مستضدات الكريات البيضاء البشرية؟ سأخبركم مرة أخرى في الشرائح التالية. لدينا أنواع مختلفة من مستضدات الكريات البيضاء البشرية بين الأشخاص في السكان. لذلك، يجب علينا التحقق من التشابه بين مستضدات الكريات البيضاء البشرية لشخصين، المتلقي والمانح، من أجل منع رفض عملية الزرع. لذا، أولاً وقبل كل شيء، سأراجع مستضدات الكريات البيضاء البشرية، مستضد الكريات البيضاء البشرية، أو مركب التوافق النسيجي الرئيسي (MHC). اسمان لشيء واحد. مركب التوافق النسيجي الرئيسي (MHC). اسم آخر لمستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). مركب التوافق النسيجي الرئيسي. توافق الأنسجة التي سيتم زرعها. مركب. وسأتحدث عن تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية أو تقييم ملف مستضدات الكريات البيضاء البشرية، بشكل أساسي تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية. ثم سأتحدث في ملخص عن الاعتبارات في المختبر الطبي لتحديد ملف مستضدات الكريات البيضاء البشرية في عمليات الزرع. تتم عدة اختبارات لعمليات الزرع، ولكننا نتحقق. نحن فقط في هذه المحاضرة سنتحدث عن تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية، وليس غيرها. لذا، فحص الأجسام المضادة لمستضدات الكريات البيضاء البشرية أو المطابقة المتبادلة، ولكننا لن نتحدث عن ذلك. من فضلكم، ألقوا نظرة هنا. خلية تقديم المستضد (APC)، خلية T، خلية تقديم. لذا، أخبروني ما هي وظيفة مستضدات الكريات البيضاء البشرية؟ وظيفة مستضدات الكريات البيضاء البشرية في علم المناعة، في الجهاز المناعي. ما هي وظيفة مستضدات الكريات البيضاء البشرية؟ بالأمس تحدثتم عنها بالكامل في المجموعة. التعرف على الذات من غير الذات. أحد أدوار مستضدات الكريات البيضاء البشرية هو تحديد الذات من غير الذات. ولكن بروتينات مستضدات الكريات البيضاء البشرية لها دور مهم جداً في التنشيط المناعي، الجهاز المناعي. هل تتذكرون وظيفة تقديم المستضدات؟ تقديم المستضدات على خلايا تقديم المستضد (APCs) وخلايا الجسم الأخرى يتم بواسطة مستضدات الكريات البيضاء البشرية. على سبيل المثال، إذا كنت خلية تقديم مستضد (APC)، فقد أريتكم أن خلية تقديم المستضد (APC) تحتاج إلى أداة لتقديم المستضد. هذه الأداة هي مستضدات الكريات البيضاء البشرية. هل تتذكرون؟ جميع الخلايا المحببة والخلايا النووية تحتاج إلى أداة لتقديم المستضد إلى خلايا T. بدون ارتباط خلية T بمركب التوافق النسيجي الرئيسي (MHC)، لن يكون لدينا تنشيط لخلية T. لذا، يجب على خلايا T الارتباط بمركب التوافق النسيجي الرئيسي (MHC) والمستضد من خلال مستقبلات خلايا T (TCR) الخاصة بها لكي يتم تنشيطها. لذا، تحتاج خلايا تقديم المستضد (APCs) وخلايا تقديم المستضد (APCs) الأخرى والخلايا النووية الأخرى إلى أداة، مركب التوافق النسيجي الرئيسي (MHC)، لتقديم المستضد إلى مستقبلات خلايا T (TCR) على خلية T. الإشارة الأولى. هل تتذكرون؟ احتجنا إلى إشارتين لتنشيط خلية T. الإشارة الأولى عن طريق ارتباط مستقبلات خلايا T (TCR) بمركب التوافق النسيجي الرئيسي (MHC) والمستضد. الإشارة الثانية عن طريق المنشطات المشتركة. هل تتذكرون؟ كل شيء واضح. لذا، هذه هي وظيفة الجهاز المناعي. وأنتم تعلمون أن لدينا ثلاث فئات من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA): الفئة الأولى، الفئة الثانية، والفئة الثالثة. مستضدات أو بروتينات الفئة الأولى من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) يتم التعبير عنها على جميع الخلايا النووية في الجسم. جميع الخلايا النووية في الجسم لديها الفئة الأولى من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) على غشائها، على سطحها. جميع الخلايا النووية. لذا، يتم التعبير عن بروتينات مركب التوافق النسيجي الرئيسي (MHC) في الخلايا النووية وتقدم المستضدات السيتوبلازمية أو المستضدات داخل الخلايا إلى خلايا T السامة للخلايا أو خلايا T الإيجابية CD8. هل تتذكرون؟ نعم، خلايا T الإيجابية CD8 لكي يتم تنشيطها، يجب أن ترتبط مستقبلات خلايا T (TCR) الخاصة بها ببروتينات الفئة الأولى من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) والمستضدات التي تكون في سياق الفئة الأولى من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). الفئة الأولى من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) هي مجرد أداة. المستضد مهم في تنشيط خلية T. إنه كذلك. هل هذا واضح؟ نعم، المستضد مهم بالطبع لتنشيط خلية T، ولكن يجب أن يكون هذا المستضد في سياق مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). يتم التعبير عن الفئة الأولى من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) على سطح جميع خلايا الجسم، وهي تقدم المستضدات داخل الخلايا أو المستضدات السيتوبلازمية إلى خلايا CD8 الإيجابية أو الخلايا السامة للخلايا. من ناحية أخرى، يتم التعبير عن بروتينات أو مستضدات الفئة الثانية من مركب التوافق النسيجي الرئيسي (MHC) على خلايا تقديم المستضد (APCs) وبعض الخلايا المناعية الأخرى فقط، وليس على جميع الخلايا النووية. لذا، خلايا تقديم المستضد (APCs) وبعض الخلايا المناعية الأخرى لديها الفئة الثانية من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) التي تقدم المستضدات خارج الخلايا إلى خلايا T المساعدة أو خلايا T الإيجابية CD4. هل هذا صحيح؟ نعم، خلايا T الإيجابية CD4 تقدم المستضدات خارج الخلايا. يتم التعبير عنها أو تقديمها بواسطة الفئة الثانية من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) التي تكون على خلايا تقديم المستضد (APCs). يتم تنشيط خلايا T الإيجابية CD4 أو خلايا T السامة للخلايا بواسطة الفئة الأولى من مركب التوافق النسيجي الرئيسي (MHC) بالإضافة إلى المستضدات داخل الخلايا التي تكون على الخلايا النووية للجسم، بالإضافة إلى خلايا تقديم المستضد (APCs). هل هذا واضح؟ نعم. ولدينا الفئة الثالثة من مركب التوافق النسيجي الرئيسي (MHC). لدينا عدة جينات، كلها تسمى الفئة الثالثة من مركب التوافق النسيجي الرئيسي (MHC). تسمى فقط اسم الفئة الثالثة لأن جميع جينات مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) التي تسمى مركب التوافق النسيجي الرئيسي (MHC) تسمى مركبًا لأن لدينا عدة جينات تقع على الكروموسوم 6 معًا، قريبة من بعضها البعض. ولكن الجينات المتعددة تقع بين موقع الفئة الأولى من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) والفئة الثانية من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). لذا، بما أنها تقع بين موقع الفئة الأولى والثانية من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA)، فهي تسمى الفئة الثالثة من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). ولكنها لا تفعل شيئًا في تقديم مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). عندما نتحدث عن تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA)، وتقديم المستضدات، وتنشيط خلايا T، وخلايا تقديم المستضد (APCs)، والعديد من المصطلحات المناعية الأخرى، فإننا نتحدث فقط عن الفئة الأولى والثانية من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA)، وليس الفئة الثالثة. إنه مجرد اسم لعدة جينات أولية ومنتجاتها. هذه الجينات تقع بين جينات الفئة الأولى والثانية. لذا، نحن لا نفعل شيئًا بالفئة الثالثة من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). نحن نتحدث فقط عن الفئة الأولى والثانية. يمكنك أن ترى هنا بنية الفئة الأولى والفئة الثانية. هذه فئة واحدة وهذه فئة اثنتان. في الفئة الأولى من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA)، لدينا سلسلة ألفا وواحدة بيتا 2، بيتا 2 ميكروغلوبولين. هل تتذكرون؟ نعم. تتكون الفئة الأولى من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) من سلسلتين مختلفتين. السلسلة الأولى تسمى سلسلة ألفا، والثانية هي بيتا 2 ميكروغلوبولين. ولكن في الفئة الثانية من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA)، لدينا سلسلتان: ألفا واحدة وبيتا. هناك فرق بينهما. يمكنك أن ترى هنا. بالإضافة إلى جينات ألفا من الفئة الأولى من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) وجينات ألفا وبيتا من الفئة الثانية من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) تقع في منطقة مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA)، ولكن جين بيتا 2 ميكروغلوبولين يقع على كروموسوم مختلف، الكروموسوم 15. تقع كل هذه المركبات على الذراع القصيرة للكروموسوم 6 في الإنسان. ولتحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA)، لا نحتاج إلى تحديد بيتا 2 ميكروغلوبولين. لذا، تحديد بيتا 2 ميكروغلوبولين ليس ضروريًا في عملية الزرع. ولكن يجب فحص سلسلة ألفا من الفئة الأولى وسلاسل ألفا وبيتا من الفئة الثانية قبل عملية الزرع. ولكن ليس من الضروري التحقق من [غير واضح]. أسئلة، تعليقات؟ لا. وكما تتذكرون، لدينا ثلاث فئات من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) الفئة الأولى: HLA-A، HLA-B، و HLA-C. وثلاث فئات من الفئة الثانية: HLA-DP، HLA-DQ، و HLA-DR. كتذكير. هل تتذكرون؟ HLA-A، HLA-B، HLA-C كفئة أولى. و HLA-DP، HLA-DQ، HLA-DR كفئة ثانية. لم نأخذها بهذه الأسماء. لم تسمعوا بنظام المكمل هذا؟ لا، أنا أتحدث عن مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). نحن لدينا فئتان مختلفتان من. نحن نعرف الفئات، ولكن هذه الأسماء لم نفعلها. حسناً، أنا أخبركم. لدينا الفئة الأولى من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) والفئة الثانية من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). وفي كل منها، لدينا ثلاث مستضدات مختلفة من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). لدينا ثلاث فئات من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) الفئة الأولى: HLA-A، HLA-B، و HLA-C. وثلاث فئات من الفئة الثانية: HLA-DP، HLA-DQ، و HLA-DR. إنها ثلاث مستضدات مختلفة من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) من الفئة الثانية. هل هذا واضح؟ نعم. وهي تقع كما قلت على الذراع القصيرة للكروموسوم 6. حسناً، هذا هو الكروموسوم 6. وجينات مركب التوافق النسيجي الرئيسي (MHC) تقع على الذراع القصيرة للكروموسوم 6. كلها هنا. هناك ملاحظة مهمة جداً هنا، من فضلكم. لدينا جين واحد لـ HLA-A، جين واحد لـ HLA-C، آسف، واحد لـ HLA-B. كلها من الفئة الأولى من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). لذا، HLA-A، HLA-B، و HLA-C كلها من الفئة الأولى. كلها يتم التعبير عنها في الخلايا النووية لأنها من الفئة الأولى. كلها تقدم المستضدات داخل الخلايا. كلها تقدم المستضدات السيتوبلازمية إلى خلايا CD8 الإيجابية السامة للخلايا. كلها واحدة. ويمكنك أن ترى هنا أن لدينا جينين لـ DP، جينين لـ DQ، وحتى أكثر من جينين لـ DR. ولكن بالنسبة للفئة الأولى، لدينا جين واحد فقط لكل منها. هذا لأنه كما قلت، جين ألفا فقط موجود هنا. بيتا 2 ميكروغلوبولين يقع في مكان آخر. ولكن هنا، هذا هو جين ألفا DP، جين بيتا DP. كما أخبرتكم، الفئة الثانية من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) تتكون من سلسلتين: ألفا وبيتا. كل منها له جينه الخاص. لذا، لدينا جينان مختلفان يرمزان ألفا وبيتا. لذا، فهو ألفا DP وبيتا DP، ألفا DQ وبيتا DQ. ألفا DR. وحتى في بعض الأحيان، لدينا أكثر من جين واحد لسلسلة بيتا: بيتا 1، بيتا 2، وثلاثة. هل هذا واضح؟ يمكنك أن ترى DP، DQ، DR، B، C، A. كلها من الفئة الأولى. كلها من الفئة الثانية. لدينا بعض الجينات الأخرى بين الفئة الأولى والثانية والتي تسمى الفئة الثالثة. لأنها تقع بين جينات مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). لذا، فهي لا تفعل شيئًا في تقديم المستضدات، كما أخبرتكم، وفي عمليات الزرع. ومرة أخرى، ألفا DP، بيتا DP، DQ ألفا، بيتا DQ، DR ألفا، بيتا 1، بيتا 2، وأحيانًا بيتا 3، 4، و 5. و B، ألفا فقط. C، ألفا فقط. A، ألفا فقط. هل هذا واضح؟ جينات مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). هنا، السيد يعني للسيدات، السيدة. [موسيقى] حسناً، جينات مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) موروثة كـ HLA. ماذا يعني هذا، من فضلكم؟ ليس لدينا وقت كافٍ. جينات مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) موروثة كـ HLA. ماذا يعني هذا؟ الأم، الأب؟ نعم. ماذا يعني HLA؟ نصف؟ لا، نصف لا. مجموعة من الجينات. مجموعة من الجينات التي تقع قريبة من بعضها البعض ويتم توريثها معًا للطفل. وعندما نقول مجموعتين، كل شخص لديه مجموعتان من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). مجموعة واحدة من الأب، ومجموعة واحدة من الأم. نعني مجموعة واحدة، هذه هي HLA-A، B، C، DP، DQ، و DR. مجموعة واحدة تعني كل مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). وهذه بالفعل مجموعة واحدة من جينات مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). ثلاث فئات من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) الفئة الأولى، وثلاث فئات من الفئة الثانية. ومجموعة أخرى من الأم أو الأب. واحدة من الأب، وواحدة من الأم. واحدة منهم من الأب، وواحدة منهم من. هل هذا صحيح؟ نعم. يتم توريثها معًا. لدي صورة لهذا في الشرائح التالية. بالإضافة إلى ذلك، يتم توريث جينات مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) بشكل مشترك سائد. ماذا يعني هذا؟ هذه المفاهيم مهمة جداً، مهمة جداً. هذه المفاهيم ستكون مفيدة لكم في العيادة إذا كنتم ستعملون مع عمليات زرع الأنسجة. لذا، معرفة بروتوكولات الاختبار ليست بنفس أهمية هذه المواضيع أو المفاهيم التي أحاول شرحها لكم. لذا، يتم توريث جينات مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) بشكل مشترك سائد. ماذا يعني هذا؟ مشترك سائد. إنه مصطلح بيولوجي. الأم والأب ينقلان إلى الطفل. مرة أخرى، من فضلكم. كلا الأليلين من الأم والأب يتم التعبير عنهما بواسطة الطفل. جميع الأليلات التي يتم توريثها من الأب والأم يتم التعبير عنها في وقت واحد. دعوني أعطيكم مثالاً. إذا كان فصيلة دم الأب A، وفصيلة دم الأم O، فإن فصيلة دم الطفل ستكون A. فصيلة الدم. أنا أتحدث عن النمط الظاهري، وليس النمط الجيني. ستكون فصيلة الدم A. الأب A، الأم O، أو الأم A، الأب O، لا يهم. الطفل سيكون A. ولكن إذا كان الأب A والأم B، فإن الأب سيكون A. هذا لأنهما A و B مشتركين سائدين. لديهما تعبير مشترك سائد. ولكن A سائد على O. عندما يكون لدينا A و O، لدينا فقط مستضدات O على سطح الخلية. ليس مستضدات O. هذا لأنه A سائد على O، و B سائد على O أيضًا. ولكن A و B معًا هما مشتركين سائدين. تعبير A لن يؤثر على تعبير B. عندما لا يؤثر تعبير جين واحد على الآخر على الكروموسوم الآخر. لدينا مجموعتان من كل جين. واحدة من الأب، وأخرى من الأم. لذا، عندما لا يؤثر تعبير جين واحد على تعبير الآخر، يسمى هذا تعبيرًا مشتركًا سائدًا. على سبيل المثال، إذا كان لدى شخص ما A و O، أو B و O. إذا كان الأب أو الأم B، والآخر O، فسيكون الطفل B. لذا، نحن دائمًا لا نختار O. لذا، على سبيل المثال، إذا كان لدى شخص ما HLA-A، B، C، DP، DQ، و DR من مجموعة واحدة من الأب، ومجموعة أخرى من الأم. كلها، كلها يتم التعبير عنها على سطح الخلايا. تعبير A من الأم لن يؤثر على تعبير A من الأب. تعبير B من الأم لن يؤثر على تعبير B. بالإضافة إلى ذلك، تعبير A لن يؤثر على تعبير B، وهكذا. كلها يتم التعبير عنها في وقت واحد على سطح الخلايا. هل هذا واضح؟ يسمى هذا تعبيرًا مشتركًا سائدًا للجينات. مصطلح مهم آخر. هذا هو الأساس لتحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). هذا هو سبب قيامنا بتحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). جينات مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) متعددة الأشكال للغاية. الجينات الأكثر تعددًا للأشكال في الإنسان، وأعتقد في الأنواع الأخرى هي جينات HLA-A. إنها الجينات الأكثر تعددًا للأشكال في الجسم. ماذا يعني هذا؟ الجينات هي الجينات الأكثر تعددًا للأشكال في الجسم. ماذا يعني هذا؟ هذا المفهوم مهم جدًا لكل ما تفعلونه اليوم في هذه المحاضرة. ماذا يعني تعدد الأشكال؟ أشكال عديدة. أشكال عديدة لـ [موسيقى] جين واحد. أليلات مختلفة أو أشكال مختلفة لجين واحد في السكان. هذا يعني أن لدينا ليس فقط HLA-A واحدًا، لدينا الآلاف من HLA-A المختلفة، والآلاف من HLA-B المختلفة، والآلاف من HLA-C المختلفة، وهكذا. ولكن كما أخبرتكم، تحديد بيتا 2 ميكروغلوبولين ليس ضروريًا في عملية الزرع. هذا لأنه بيتا 2 ميكروغلوبولين ليس متعدد الأشكال. بيتا 2 ميكروغلوبولين لجميع البشر هو نفسه. لا حاجة للتحقق منه لأنه متطابق تمامًا. إذا حقنا بيتا 2 ميكروغلوبولين لشخص ما لشخص آخر، فلن يكون لدينا أي رد فعل مناعي. هذا لأنهما متطابقان تمامًا. هل هذا واضح؟ ولكن إذا قمنا بزرع نسيج من مانح مستضداته HLA-A2، إذا تم زرع نسيج يحتوي على HLA-A2 لشخص لديه HLA-A45، فلدينا HLA-A2 مختلفان. سيتم اعتبار HLA-A2 في جسم المتلقي مستضدًا غريبًا، جسمًا غريبًا. هل هذا واضح؟ وسيتم تنشيط الجهاز المناعي، وسيكون لدينا أجسام مضادة وخلايا T نشطة ضد خلايا النسيج. هل هذا واضح؟ لذا، لدينا الآلاف من مستضدات HLA-A، أعني الفئة الأولى A. الآلاف من B، الآلاف من C، وهكذا في السكان. وهدف هذه المحاضرة هو التحقق من تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). أعني، التحقق من نوع مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) على سطح خلايا المانح والمتلقي لعمليات زرع الأنسجة. كما يمكنك أن ترى هنا على سطح الخلايا، لدينا 12 مستضدًا مختلفًا من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). ثلاث فئات من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) الفئة الأولى من الأم، وثلاث فئات من الفئة الثانية من الأم. وعلى الجانب الآخر، ثلاث فئات من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) الفئة الأولى من الأب، وثلاث فئات من الفئة الثانية من الأب. مرة أخرى. لذا، لدينا [موسيقى] ست فئات من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) من الأم والأب، وست فئات من الفئة الثانية من الأم. وهذه هي HLA. HLA موروثة من، على سبيل المثال، الأم. لدينا ستة أنواع مختلفة. ثلاثة أنواع من الفئة الثانية، وثلاثة أنواع من الفئة الأولى. و HLA أخرى من الأب. ثلاثة من الفئة الثانية من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) وثلاثة من الفئة الأولى. لذا، على سطح الخلايا، لدينا 12. هناك هذا الاحتمال بأن لدينا 12 مستضدًا مختلفًا من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). HLA-A2، HLA-B2، HLA-C2، HLA-DP2، HLA-DQ2، HLA-DR2. ويجب علينا تحديدها جميعًا. وسنتحقق من نوع هذه الأليلات على خلايا المانح والمتلقي عن طريق إجراء اختبار تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). واضح؟ نعم. أسئلة، تعليقات؟ لا. كما أخبرتكم، كل شخص، كل شخص لديه مجموعتان من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). كل شخص لديه مجموعتان من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). مجموعة واحدة من الأب، ومجموعة أخرى من الأم. ثم نقول مجموعة من الأب أو الأم، نعني HLA-A، B، C، DP، DQ، و DR. من فضلكم. ومجموعة أخرى من الأم. وللأم، مماثل للأب. كل شخص في المجتمع، في السكان، لديه مجموعتان. عندما نقول مجموعتان، كل مجموعة تحتوي على ستة جينات على الأقل. ستة. ثلاث فئات من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) الفئة الأولى، وثلاث فئات من الفئة الثانية. وستة أخرى من الأب. لذا، كل شخص لديه 12 فئة مختلفة من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). وعلى سبيل المثال، هذا الطفل. يستقبل HLA-A من الأب و HLA-C من الأم. لذا، عندما يستقبل HLA-A من الأم، فإنه يستقبل مجموعة واحدة من ستة جينات HLA وستة أخرى من الأم. هل هذا واضح؟ نعم. من فضلكم، أسئلة، تعليقات؟ لا. وكما أخبرتكم، هذه الطاولة توضح تعدد أشكال مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). لدينا أكثر من 2000 HLA-A في السكان. أكثر من 3000 HLA-B، وهكذا. كما يمكنك أن ترى هنا، بالنسبة للفئة الأولى من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA)، لدينا جين واحد فقط. ولكن بالنسبة للفئة الثانية من مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA)، لدينا ألفا DP، 22 ألفا DP مختلفة، بيتا DP، أكثر من 500، حوالي 600 بيتا DP واحد. هل هذا واضح؟ نعم. عندما نقول إن الجين متعدد الأشكال، فهذا يعني أن لدينا أشكالًا مختلفة، أليلات مختلفة لهذا الجين في السكان أو المجتمع. هذا لأنه نحتاج إلى التحقق من نوع مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) على خلايا الأنسجة، على خلايا المتلقي والمانح. للعثور على نوع مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) متشابه بين المانح والمتلقي. على سبيل المثال، إذا كنت متلقيًا، أحتاج إلى كلية. يجب فحص مستضداتي لتحديد ما هي جينات مستضداتي. وفي مجموعة المانحين، يجب علينا إجراء تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) للعثور على التشابه بين المانح والمتلقي. هل هذا واضح؟ نعم. هل من الممكن العثور على تشابه مع شخص ليس من أقاربك؟ نعم، نعم. هل هي فرصة جيدة؟ هل هي فرصة جيدة؟ لا، إنها [غير واضح]. هذا لأنه معظم المرضى الذين ينتظرون عملية زرع لا يمكنهم العثور على زرع متوافق. وقبل العثور على زرع متوافق، قد يموتون. هذا شائع جدًا. معظم المرضى الذين ينتظرون عضوًا لا يمكنهم العثور على عضو متوافق. وقبل العثور عليه، قد يموتون. أسئلة، تعليقات؟ دعوني أقول هذا. لذا، من فضلكم، اذهبوا إلى المختبر الآن، ويجب عليكم القيام بخطوة واحدة من اختباركم في المختبر، ثم العودة إلى الفصل مرة أخرى. حسناً، الآن. نعم، لبقية المحاضرة، اذهبوا إلى المختبر. افعلوا شيئًا. الجميع. مرحباً. اليوم نريد إجراء تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) في المختبر. نحتاج إلى دم طازج. لدينا ذلك. نأخذ الدم، ونخفف الدم باستخدام PBS. ما هو PBS؟ إنه محلول ملحي متساوي التوتر للتخفيف. الدم يحتاج إلى محلول ملحي متساوي التوتر. نستخدم PBS. لقد خففناه بالفعل وهو جاهز للاستخدام لكم. في رفكم، على طاولتكم، لديكم أنبوب آخر يحتوي على مادة خاصة نسميها F. F هو محلول سكري مركز لفصل الخلايا الليمفاوية عن الدم الكامل. بسبب اختلاف الكثافة بين F والدم الكامل. وبعد الطرد المركزي، يمكنك فصل الخلايا الليمفاوية. F سام جدًا لخلايا الدم الكاملة. لهذا السبب، يرجى الانتباه. لا تخلطوا الدم مع F. سأريكم كيف يمكنك استخدام F لفصل البلازما دون خلطها مع بعضها البعض. أولاً، أضغط الفقاعة، وآخذ الدم بهذه الطريقة. بعد ذلك، أضع طرف القطارة على سطح الطبقة الداخلية للأنبوب، وببطء شديد، أضغط فقاعة القطارة. الآن يمكنك أن ترى. لقد أنشأت طبقتين. الطبقة العلوية هي الدم، والأخرى هي F. افعلوا ذلك ببطء شديد، ولا تخلطوا الدم مع F. وأضيفوا كل الدم الذي لديكم في أنبوبكم. يجب إضافة كل الدم الذي لديكم على سطح F. افعلوا ذلك. وعندما تنتهون، أحضروه إلينا. نضعه في جهاز الطرد المركزي، ونقوم بتدويره بسرعة 1800 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة. بعد ذلك، عندما نخرجه من جهاز الطرد المركزي، سنفصل الخلايا الليمفاوية. سأريكم كيف يمكنك فصل الخلايا الليمفاوية. أما الآن، إذا لم يكن لديكم أي أسئلة، وإذا كان الأمر واضحًا، فيمكنكم الذهاب إلى طاولتكم والقيام بذلك. وبعد ذلك، أحضروا أنابيبكم إلينا لوضعها في جهاز الطرد المركزي. هل هذا واضح، من فضلكم؟ حسناً. تفضلوا بالجلوس. تفضلوا بالجلوس. حسناً. [موسيقى] وراثة النمط، التعبير المشترك السائد. أنا أتحدث عن الكلمات المفتاحية المهمة: وراثة النمط، التعبير المشترك السائد، وتعدد الأشكال في مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). كلها واضحة؟ لا توجد أسئلة حولها؟ حسناً. لا توجد أسئلة. لزرع الأنسجة أو الأعضاء، المشكلة الرئيسية، العقبة الرئيسية لزرع الأنسجة، الزرع يعني عملية زرع أخرى لعملية الزرع. المشكلة الرئيسية في زرع الأنسجة هي رفض النسيج المزروع. أعني بالنسيج المزروع، الجهاز المناعي. إنها المشكلة الرئيسية لزرع الأنسجة. وهدف تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) وتحديد مجموعات الدم الأخرى هو تقليل. أقول تقليل خطر رفض عملية الزرع. نحاول تقليل خطر رفض عملية الزرع. دائمًا هناك خطر لرفض عملية الزرع، ولكننا نقوم ببعض الاختبارات لتقليل الخطر. المشكلة الرئيسية هي رفض الجهاز المناعي للزرع. وإذا أردنا الحصول على زرع ناجح أو عملية زرع ناجحة، أولاً وقبل كل شيء، يجب علينا محاولة العثور على نسيج أو مانح متوافق. العامل الأول المهم جدًا في مصير النسيج المزروع هو العثور على نسيج متطابق أو متوافق من حيث خصائصه المستضدية. أعني، كلما زاد التوافق، قل احتمال رفض عملية الزرع. كلما قل التوافق، زاد خطر رفض عملية الزرع. شيء آخر مهم جدًا. يجب على المتلقين الذين يزرعون، آسف، متلقو الزرع، دائمًا تناول الأدوية المثبطة للمناعة. هذا لأنه كما أخبرتكم، جينات مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) هي الجينات الأكثر تعددًا للأشكال في الجسم. الجينات الأكثر تعددًا للأشكال في الجسم. ولكن هذا لا يعني أنها الجينات المتعددة الأشكال الوحيدة في الجسم. هناك جينات أخرى متعددة الأشكال لم يتم تحديدها بعد. لذا، هذا هو السبب في أن هناك دائمًا خطر رفض عملية الزرع. وهذا هو السبب في أن المريض يجب أن يتناول الأدوية المثبطة للمناعة طوال الوقت. المتلقي يجب أن يتناول الأدوية المثبطة للمناعة طوال الوقت لتقليل المناعة، لتقليل خطر رفض عملية الزرع. هل هذا واضح؟ فقط لمدة كم؟ بقية حياته؟ لبقية حياته؟ نعم. يجب على متلقي الزرع تناول الأدوية المثبطة للمناعة لبقية حياته. لأن إيجاد توافق 100٪ بين المتلقي والمانح غير ممكن. نعم، هذا يجعله أكثر عرضة للأمراض. نعم، نحاول إعطائهم تثبيطًا مناعيًا متوازنًا. ولكن متلقي الزرع لديهم دائمًا خطر أكبر للإصابة بالعوامل المعدية. أنت على حق. ولكننا نحاول تحقيق توازن بين هذا وبين حياة أطول مع الأدوية المثبطة للمناعة وخطر أعلى للأمراض المعدية. حسناً. لذا، أولاً وقبل كل شيء، يجب علينا محاولة العثور على عضو متوافق بين المتلقي والمانح. ومن غير الممكن العثور على توافق 100٪. لذا، دائمًا هناك فرق بين المتلقي والمانح. دائمًا هناك احتمالية لتنشيط مناعي، رد فعل مناعي ضد الطعم المتجانس أو الطعم أو عملية الزرع. عندما نقول رفض عملية الزرع، نعني تنشيط الجهاز المناعي. على سبيل المثال، إنتاج الأجسام المضادة أو تنشيط خلايا T ضد خلايا الطعم. وتنشيط الجهاز المناعي، ثم إنتاج الأجسام المضادة أو غزو الخلايا السامة للخلايا للطعم سيقتل خلايا الطعم. لذا، رفض عملية الزرع يعني قتل خلايا الطعم بواسطة الجهاز المناعي للمتلقي. إنه رد فعل مناعي. هل هذا واضح؟ نعم. ونحن نقوم بتحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) لتقليل هذا الخطر، لمنع رفض عملية الزرع، قدر الإمكان. أسئلة، تعليقات؟ لا. نحن نقوم، باستثناء تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA)، وبعض الاختبارات الأخرى بالطبع. يتم إجراء تحديد مجموعات الدم قبل تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). هذا لأنه تعلمون أن لدينا مجموعات دم مختلفة في السكان. لذا، يجب أن يكون لدى المتلقي والمانح مجموعة دم متشابهة أيضًا. لا يُسمح لنا بزرع، على سبيل المثال، شخص لديه فصيلة دم A لشخص لديه فصيلة دم O. بالإضافة إلى ذلك، سنقوم بتحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) واختبارات أخرى. ولكن اليوم سنتحدث عن تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). هناك عدة طرق للكشف عن أنواع مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). كما تعلمون، كما قلت، لدينا الآلاف من HLA-A، الآلاف من HLA-B، الآلاف من HLA-C، ومئات أخرى. هل هذا واضح؟ هل تتذكرون؟ وباستخدام تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA)، سنقوم بالكشف عن نوع مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) للمتلقي والمانح. ما إذا كانوا متوافقين أم لا. ويتم استخدام عدة طرق لهذا الغرض. واحدة من أبسط الطرق هي منهجية serology. اختبار serology أو اختبار serology. هي مجموعة من الاختبارات التي نستخدم فيها جميعًا تفاعل الجسم المضاد مع المستضد للكشف عن أحدهما. من فضلكم. serology تعني استخدام تفاعل المستضد والجسم المضاد للعثور على أحدهما، للتحقق من أحدهما. على سبيل المثال، نريد التحقق مما إذا كان هناك فيروس الورم الحليمي البشري (HPV) داخل دم شخص ما أم لا. في المختبر، قمنا بإنتاج جسم مضاد ضد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). مضاد لمستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). آسف، مضاد لفيروس الورم الحليمي البشري (HPV). تم إنتاج جسم مضاد لفيروس الورم الحليمي البشري (HPV) بواسطة الشركة، ولدينا في المختبر الآن. ونستخدم هذا الجسم المضاد للتحقق من دم الشخص، ما إذا كان هناك أي مستضد بداخله أم لا. تفاعل الجسم المضاد مع مستضد معين. جميع الاختبارات التي نستخدم فيها تفاعل الجسم المضاد والمستضدات، بشكل عام، تسمى اختبارات serology. لذا، أبسط طريقة لتحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) للمتلقي هي اختبار serology. لذا، في اختبار serology، نستخدم الأجسام المضادة. يمكنك أن ترى في الشريحة التالية. الاختبار الذي هو اختبار serology، والذي يستخدم لتحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) للمانح والمتلقي في طريقة serology يسمى السمية الخلوية المعتمدة على المكمل (CDC). السمية الخلوية المعتمدة على المكمل (CDC). كما يجب أن تتذكروا، عندما يرتبط الجسم المضاد بالخلية، IgG و IgM. أعني، هل تتذكرون؟ لدينا فئات مختلفة من الأجسام المضادة. ولكن اثنان منهم يمكنهما تنشيط المكمل بعد ارتباط جسم مضاد واحد بالخلية. IgG و IgM. أعني، سيكون لدينا تنشيط للمكمل بعد ذلك. هل هذا واضح؟ هل تتذكرون CDC من محاضرة الأمس أو المحاضرة السابقة؟ السمية الخلوية المعتمدة على المكمل (CDC) كانت إحدى وظائف المناعة الخلطية أو وظيفة الجسم المضاد. هل تتذكرون؟ لذا، نستخدم هذا الاختبار لتحديد نوع المستضد. بعد ارتباط الجسم المضاد بالخلية، سيكون لدينا تنشيط للمكمل، ثم تكوين مركب هجوم الغشاء. هل تتذكرون؟ بعد تكوين مركب هجوم الغشاء، ماذا سيحدث للخلية؟ [موسيقى] تحلل الخلية. مركب هجوم الغشاء سيصنع ثقوبًا في غشاء الخلية. نتيجة لتكوين ثقوب في غشاء الخلية، ستموت الخلية. هل هذا واضح؟ سيكون لديك تحلل خلوي. لذا، دعونا نرى ما يحدث في HLA. حتى الآن، في المختبر، أخذنا الدم من المتلقي والمانح، على سبيل المثال. وأضفنا الدم على F. الدم الكامل. أضفنا الدم الكامل على F لفصل الخلايا وحيدة النواة المحيطية (PBMCs). تعلمون أن في الدم لدينا عدة أنواع من الخلايا: العدلات، الحمضات، الخلايا الوحيدة، الخلايا الليمفاوية، خلايا الدم الحمراء، الصفائح الدموية. هل تتذكرون؟ هناك أنواع مختلفة من الخلايا في هذا الدم. الدم المحيطي أو الدورة الدموية للإنسان. هل هذا واضح؟ لذا، أخذنا الدم الكامل أو الدم الطازج من المانح والمتلقي. وأضفنا الدم على F لفصل الخلايا وحيدة النواة المحيطية (PBMCs). الخلايا وحيدة النواة في الدم هي بشكل أساسي الخلايا الليمفاوية والخلايا الوحيدة. لذا، نستخدم الخلايا وحيدة النواة المحيطية (PBMCs) للمانح والمتلقي للتحقق من نوع مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). لتحديد نوع مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). حتى الآن، لقد فصلتم فقط الخلايا وحيدة النواة المحيطية (PBMCs). في الخطوة التالية، سنقوم ببقية الاختبار لتحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). هل هذا واضح؟ نعم. لذا، في المختبر الذي تذهبون إليه، سيكون لديكم خلايا وحيدة النواة محيطية (PBMCs) تحتوي بشكل أساسي على الخلايا الليمفاوية. هل هذا واضح؟ لذا، السؤال هو هذا: هدف هذا الاختبار هو التحقق من نوع مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) على سطح هذه الخلايا. حسناً. على سبيل المثال، نحن نريد التحقق مما إذا كان الشخص لديه HLA-A02 أم لا. كمثال. لدينا عدة HLA-A، عدة HLA-B، عدة HLA-C. على سبيل المثال، نريد التحقق مما إذا كانت هذه الخلايا تعبر عن HLA-A02 أم لا. نريد التحقق من هذا. إذا أردنا التحقق من هذا، فنحن بحاجة إلى جسم مضاد في المختبر. جسم مضاد لـ HLA-A02. في المختبر، لدينا بالفعل الآن جسم مضاد لـ HLA-A02. تم إنتاجه في الشركة ولدينا في المختبر. سنضيف هذا الجسم المضاد إلى هذه الخلايا. إذا كانت هذه الخلايا تعبر عن HLA-A02، فسيرتبط هذا الجسم المضاد بالخلايا. هل هذا واضح؟ إذا كانت الخلايا لا تعبر عن HLA-A02، فلن يرتبط الجسم المضاد بها. حسناً؟ نعم. السؤال هو هذا: هل تعبر هذه الخلايا عن HLA-A02 أم لا؟ نتحقق من ذلك عن طريق إضافة كل جسم مضاد محدد. لذا، قمنا بفصل الخلايا وحيدة النواة المحيطية (PBMCs). ثم سنضيف الجسم المضاد، على سبيل المثال، HLA-A02، إلى الخلايا. إذا تم التعبير عن HLA-A02 على الخلايا، فسيرتبط الجسم المضاد بالخلايا. ثم سنضيف مصدر المكمل إلى الاختبار. سنضيف المكمل إلى الاختبار. بعد إضافة المكمل، إذا كان الجسم المضاد مرتبطًا بالخلايا، فسيكون لدينا تنشيط للمكمل. حسناً؟ جسم مضاد مرتبط بالخلية، وتنشيط للمكمل، ثم مركب هجوم الغشاء، وتكوين ثقوب أو مسام على غشاء الخلية. هل تتذكرون؟ هذه صور حقيقية تم التقاطها بواسطة مجهر إلكتروني. يمكنك رؤية الثقوب. كلها مصنوعة بواسطة مركب هجوم الغشاء للمكمل. لذا، الخلايا التي لديها أو لديها HLA-A02. تم إضافة الجسم المضاد لـ HLA-A02 إليها. بعد إضافة المكمل، كان لدينا تنشيط للمكمل وتكوين ثقوب أو مسام على غشاء الخلايا. ثم سنضيف صبغة، بشكل أساسي، إلى الخلية. إذا كانت الخلايا، بعد تكوين الثقوب، فالخلية بالطبع ميتة. الخلايا الميتة لديها الكثير من المسام عليها. ولكن الخلايا الحية لا تحتوي على أي مسام عليها. هل هذا واضح؟ لذا، بعد إضافة الصبغة، إذا كانت الخلايا مصبوغة بالفعل، إذا كان لديها مسام على غشاءها، فإن الصبغة يمكن أن تدخل الخلايا. تمتص الخلايا الصبغة، ونسميها خلية مصبوغة. خلية مصبوغة تعني ارتباط الجسم المضاد، تنشيط المكمل، تكوين ثقوب، وامتصاص الصبغة. وهذا يعني أن هذه الخلايا إيجابية لـ HLA-A02. هل هذا جيد؟ نعم. هذا يعني أن هذه الخلايا كانت إيجابية لـ HLA-A02. الجسم المضاد لـ HLA-A02 ارتبط بها، التصق بها. ثم كان لدينا تنشيط للمكمل، ثم تكوين ثقوب أو مسام، ثم امتصاص الصبغة في الخلية الميتة. ولكن في الخلية الحية، لا يوجد ارتباط للجسم المضاد، لا يوجد تنشيط للمكمل، لا يوجد تكوين ثقوب أو مسام، لا يوجد امتصاص للصبغة. لذا، إذا أضفنا الجسم المضاد إلى الخلايا التي تحتوي على المستضد المقابل، فسيكون لدينا خلية مصبوغة. ولكن إذا أضفنا الجسم المضاد إلى مجموعة من الخلايا التي لا تحتوي على المستضد، فلن يكون لدينا خلية مصبوغة. كل الخلايا ستبقى على قيد الحياة بعد الاختبار. هل هذا واضح؟ نعم. يسمى هذا السمية الخلوية المعتمدة على المكمل. لذا، قلت لكم جسمًا مضادًا واحدًا لمستضد واحد كمثال. ولكن أخبرتكم أن لدينا عدة مستضدات HLA. لذا، يجب علينا التحقق من عدة مستضدات HLA. لقد شرحت لكم مثالًا واحدًا فقط. جسم مضاد واحد، مستضد واحد. إذا كان على الخلايا، كان لدينا خلية مصبوغة. إذا لم يكن على الخلايا، كان لدينا خلية غير مصبوغة. هل هذا جيد؟ نعم. ولكن للتحقق من وجود أو عدم وجود عدة مستضدات HLA على الخلايا، نحتاج إلى اختبار. نحتاج إلى طبق. من فضلكم، طبقان. لدينا طبق به عدة آبار. هناك آبار. يسمى هذا الطبق طبقًا متعدد الآبار. طبق متعدد الآبار. في قاع كل طبق، لدينا جسم مضاد واحد. لذا، بئر لـ HLA-A02، بئر آخر، على سبيل المثال، لـ HLA-B02، بئر آخر لـ HLA-B25، بئر آخر لـ HLA-DR25، وهكذا. لذا، في قاع كل بئر، لدينا جسم مضاد مختلف. وسنضيف الخلايا وحيدة النواة المحيطية (PBMCs) للمانح أو المتلقي إلى جميع الآبار في وقت واحد. هذا لأنه نريد التحقق من وجود أو عدم وجود عدة مستضدات HLA. في الواقع، نحن نجري الاختبار الذي شرحته لكم في عدة آبار. كل العمليات التي شرحتها تحدث داخل الآبار. ولكن الجسم المضاد مختلف. هل هذا واضح؟ نعم. دعوني أكتب ذلك هنا. لدينا عدة آبار. في قاع كل بئر، لدينا أجسام مضادة تم ترميزها في الشركة. إنها ملتصقة بقاع الآبار. هذا لـ HLA-A02. هذا، على سبيل المثال، لـ HLA-B25. هذا لـ DP. لـ DR25. هذا لـ DQ. على سبيل المثال، 10. يتم إجراء الاختبار داخل الآبار. إذا كان لدينا خلية مصبوغة في هذا البئر، فهذا يعني ارتباط الجسم المضاد، تنشيط المكمل، تكوين ثقوب، امتصاص الصبغة. لذا، سيكون إيجابيًا لـ HLA-A02. وفي بئر آخر، ثم نتحقق من الآبار تحت المجهر. أنا أتحقق من الآبار تحت المجهر. في البئر التالي، إذا لم يكن لدينا ارتباط للجسم المضاد بالخلية، فلن يكون لدينا ارتباط للجسم المضاد. لذا، لن يكون لدينا تنشيط للمكمل، ولن يكون لدينا تكوين ثقوب أو مسام، ولن يكون لدينا امتصاص للصبغة. لذا، فهي غير مصبوغة تحت المجهر. ونقول إنها سلبية لـ HLA-B25، وهكذا. يتم فحص كل الباقي واحدًا تلو الآخر للمتلقي والمانح بشكل منفصل. ثم سيكون لدينا نمط من الإيجابي والسلبي. وسنقارنها معًا. إذا كان لديهم نفس مستضدات HLA، فيعتبرون متوافقين. إذا كان لديهم مستضدات HLA مختلفة، فيعتبرون غير متوافقين. لا يُسمح لنا بإجراء عملية الزرع. دكتور. لذا، نقوم بذلك للمانح والمستقبل. للمتلقي والعديد من المانحين. أوه، حسناً. أنا متلقي، أحتاج إلى نسيج. لذا، يجب إجراء الاختبار على عدة مانحين للعثور على مانح متشابه. هل هذا واضح؟ نعم. أسئلة، تعليقات؟ إنه كسول جدًا. لذا، أنتم تعملون. عندما تعملون في المختبر، يجب أخذ بعض اعتبارات السلامة البيولوجية في الاعتبار. هذا لأنه تعملون مع عينات بيولوجية: دم، خلايا، مصل، بلازما، بول. كلها يجب اعتبارها ملوثة أو مصابة بفيروس التهاب الكبد الوبائي B (HBV)، فيروس التهاب الكبد الوبائي C (HCV)، فيروس نقص المناعة البشرية (HIV)، وبعض العوامل المعدية الأخرى. لذا، تعملون مع عينات بيولوجية ويجب اعتبارها دائمًا عينات ملوثة. بالإضافة إلى ذلك، تعملون مع مواد كيميائية خطرة أو خطرة. بعضها قابل للاشتعال، بعضها أكال، وهكذا. لذا، يجب عليكم اتخاذ بعض إجراءات السلامة البيولوجية لحماية أنفسكم، عائلاتكم، أصدقائكم، محيطكم. هذا لأنه يجب عليكم ارتداء معاطف المختبر والقفازات. ويجب عليكم عدم الأكل والشرب في المختبر. أنا أتحدث عن المختبر الطبي. يجب عليكم الاعتناء بأشيائكم الشخصية مثل الهاتف الخلوي، الكمبيوتر المحمول، المفكرة، القلم، النظارات، والعديد من الأشياء الأخرى. لا يجب عليكم وضعها على الطاولات. قد تكون الطاولة ملوثة. قد تكون هناك قطرات من الدم على الطاولة. لذا، لحماية أنفسكم وعائلاتكم وأصدقائكم، لا يجب عليكم وضعها على الطاولات. أي شيء شخصي. بالإضافة إلى ذلك، يجب عليكم الاعتناء بالطاولات والأدوات. لا يجب عليكم تلويثها أيضًا. على سبيل المثال، إذا كانت قفازاتكم ملطخة بالدم، فيجب عليكم تغيير قفازاتكم فورًا حتى لا تلوثوا الطاولات والأدوات والأدوات. بالإضافة إلى ذلك، لا يجب عليكم التحدث على الهاتف. ممنوع التحدث على الهاتف. ممنوع المزاح، شفهيًا وجسديًا. هذا لأنه التحدث على الهاتف والمزاح سيشتت انتباهكم في المختبر. يجب أن تكونوا مركزين. يجب أن تكونوا مركزين لأنكم تعملون مع عينات بيولوجية، مع مواد كيميائية خطرة. يجب أن تكونوا مركزين لحماية أنفسكم. هذا كل شيء. اذهبوا إلى المختبر. عودوا إلى هنا. الأنابيب من جهاز الطرد المركزي. من فضلكم، انتبهوا وتعالوا أقرب. يمكنكم رؤية الأنابيب. عندما نحضر الأنابيب من جهاز الطرد المركزي. هذه قبل الطرد المركزي. لدينا طبقتان. هل تتذكرون؟ لدينا F ودم. والآن بعد الطرد المركزي، لدينا أربع طبقات. خلايا الدم الحمراء (RBCs). F. الطبقة العلوية هي البلازما. في منتصف البلازما و F، لدينا حلقة الخلايا الليمفاوية. لفصل الخلايا الليمفاوية. مرة أخرى، نستخدم قطارة نظيفة أخرى. أضغط الفقاعة. أمر فوق البلازما. وعندما أصل إلى سطح هذه الحلقة، ببطء شديد، أجمعها وآخذها في قطارتي. وبعد ذلك، أضعها في أنبوب آخر. افعلوا ذلك. بعد ذلك، سنواصل عملنا. سأشرح لكم. بعد فصل الخلايا الليمفاوية، يمكنكم الذهاب إلى المجهر ورؤية المحتوى. هل يمكنني أن أسألكم؟ من فضلكم، كونوا هادئين وانتبهوا إلي. بعد فصل الخلايا الليمفاوية، الخطوة التالية هي إضافة الخلايا الليمفاوية. عذرًا، إضافة الخلايا الليمفاوية إلى هذا النوع من الأطباق الخاصة التي نسميها أطباق HLA أو أطباق الزرع. بالفعل، الشركة التي اشترينا منها هذه الأطباق، قامت بالفعل بتغطية أجسام مضادة لمستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA) في قاع الآبار. عندما تضيفون الخلايا الليمفاوية إلى كل بئر، فهذا يعني إضافة المستضدات. أنتم تعلمون، مستضدات HLA، يمكنك العثور عليها على سطح الخلايا الليمفاوية. لذا، أنتم تطابقون مستضدات HLA مع الأجسام المضادة التي أضافتها الشركة بالفعل في قاع هذه الآبار. ووضع الطبق في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة. لماذا؟ للسماح للمستضد والجسم المضاد بالتفاعل مع بعضهما البعض. بعد ذلك، يجب عليكم إضافة المكمل كعامل مساعد لمركب المستضد والجسم المضاد. وحضانه لمدة 19 دقيقة في درجة حرارة الغرفة مرة أخرى. لذا، ترون، نحتاج إلى ساعتين لإجراء اختبار تحديد مستضدات الكريات البيضاء البشرية (HLA). وفي فصلكم، ليس لدينا وقت كافٍ للقيام بكل هذه الخطوات. أنا فقط أشرح لكم نظريًا. وبعد ذلك، يمكنك رؤية النتيجة تحت المجهر. بعد إضافة المكمل، نضيف صبغة. لأننا نريد ملاحظة الخلايا تحت المجهر. نحتاج إلى خلايا ملونة. نضيف صبغة بيضاء نسميها OING Y. وبعد ذلك، نحضنها لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة مرة أخرى لتثبيت الصبغة. نضيف الفورمالين ونضع الطبق في الثلاجة لمدة ساعة، ليلة. هذا يعني أكثر من سبع أو ثماني ساعات. وبعد ذلك، بعد سبع أو ثماني ساعات، يمكنك وضع الطبق تحت المجهر ورؤية الخلايا تحت المجهر. ما الذي يجب أن تراه تحت المجهر؟ تحت المجهر، سترى بئرًا، شيئًا كهذا، وهو أحمر. لأننا أضفنا بالفعل اللون الأحمر كما شرحت لكم. نسميه OING في الأبيض. إنه أحمر. يمكنك رؤيته. إنه أحمر. ولكن عندما تضعه تحت المجهر، سترى بئرًا، بئرًا أحمر يحتوي على خلايا. أي خلايا؟ الخلايا الليمفاوية. ربما ترى بعض الخلايا بهذه الطريقة، صغيرة جدًا، مثل الخرز. قد تكون لامعة. ربما ترى شيئًا كهذا. إنها ليست لامعة. إنها كبيرة. عندما نرى شيئًا كهذا تحت المجهر، نقول إنها حية. عندما نرى شيئًا كهذا، نسميها خلايا ميتة. ما الفرق بينهما؟ إذا لم يكن لديك المستضدات على سطح الخلايا الليمفاوية. إذا لم يكن لديك المستضدات، فلن يكون لديك أي تفاعل بين الأجسام المضادة والمستضدات. لذا، كل الخلايا تبقى على قيد الحياة. ونبلغ من المختبر لكم، أيها الطبيب في المستشفى، أن مستضد HLA سلبي. ولكن إذا رأيت شيئًا كهذا تحت المجهر، فهي خلايا ميتة. لماذا؟ لأن لديها المستضدات على سطحها. لديها تفاعل بين المستضد والجسم المضاد. هذا يجعلها حية وميتة. ونبلغ من المختبر لكم، أيها الطبيب في المستشفى، أن مستضد HLA الآن. يمكنك رؤية النتيجة تحت المجهر. ولكن قبل ذلك، من فضلكم، خذوا أنابيبكم وافصلوا الخلايا الليمفاوية. وافحصوها تحت المجهر. ورؤية النتيجة.